Comptage de Photons PicoQuant
Le microscope confocal A1 est couplé au système de comptage de photon PicoQuant (picoharp 300) permettant:
- des mesures de temps de vie de fluorescence (FLIM) via le pilotage d'un laser pulsé 488nm.
- des mesures de FCS (Fluorescent Correlation Spectroscopy).
Le système de comptage de photons uniques est basé sur un couplage entre un laser pulsé (Picosecond Diode Laser, 488nm) et un capteur SPAD (Single Photon Avalanche Diode). Entre chaque impulsion du laser, le système mesure le temps écoulé avant que le capteur ne récupère le 1er photon émis. L'accumulation de ces événements permet de définir le temps de vie moyen de la fluorescence présente dans chaque pixel de l'image.
Mesure de Temps de Vie de Fluorescence (FLIM)
De telles mesures peuvent, par exemple, révéler des interactions protéines-protéines dont les fluorophores respectifs entrent en FRET (transfert d'énergie).
![](https://micropicell.univ-nantes.fr/medias/photo/fret1_1382100114876.jpg?ID_FICHE=639660)
![](https://micropicell.univ-nantes.fr/medias/photo/fret2_1382100140448.jpg?ID_FICHE=639660)
Spectroscopie de Correlation de Fluorescence (FCS)
![](https://micropicell.univ-nantes.fr/medias/photo/fcs_didier_marguet_1381852055218.jpg?ID_FICHE=639660)
(D'après Didier Marguet)